上海安譜HPLC色譜純?nèi)軇?br /> 高效液相色譜流動相的選擇及注意事項如下:
1、流動相的性質(zhì)要求。一個理想的流動相溶劑應(yīng)具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。選好填料(固定相)后，強溶劑使溶質(zhì)在填料表面的吸附減少，相應(yīng)的容量因子k降低;而蛟弱的溶劑使溶質(zhì)在填料表面吸附增加，相應(yīng)的容量因子k升高。理論塔板數(shù)N一般與流動相的粘度成反比。所以選擇流動相時應(yīng)從以下幾個方面考慮∶@流動相不得改變填料的任何性質(zhì)。低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時遇到某些有機相會溶脹或收縮，從而改變色諾柱填床的性質(zhì)。流動相不能用于硅膠柱系統(tǒng)。酸性流動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。②純度。色諾柱的壽命與流動相有較大的關(guān)系，特別是其所含雜質(zhì)在柱上有大量沉積的溶劑。③與檢測圈匹配。使用紫外檢測器時，所用流動相在檢測波長下不得有吸收，或吸收很小。④粘度要低。高粘度溶劑會影響溶質(zhì)的擴散、傳質(zhì)，降低柱效，還會使柱壓增加，分離時間延長。選擇沸點在100C以下的流動相。
2、流動相的pH值。采用反相色譜法分離弱酸樣品時，通過調(diào)節(jié)流動相的pH值，以抑制樣品組分的解離，增加組分在固定相上的保留，并改善峰形的技術(shù)稱為反相離子抑制技術(shù)。對于弱酸，流動相的pH值越小，組分的k值越大，當pH值遠遠小于弱酸的pKa值時，弱酸主要以分子形式存在。分析弱酸樣品時，通常在流動相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和1%酣酸溶液;分析樣品時，通常在流動相中加入少量。
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